PRÁCTICA 6:RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITÓMETRO.

fundamento:

Ésta técnica la utilizamos cuándo queremos saber cuántas plaquetas hay en 1mm3 de sangre.

material:

gradilla 

tubo de ensayo

pipeta thoma

tubo de goma

gasas

cámara de Neuaber

cubreobjetos

una placa de petri

papel de filtro

reactivos:

Spincreact(en clase una cajita de color azul claro)

agua destilada.

muestra:

sangre reciente y recogida en un tubo con EDTA.

técnica:

1.Con una pipeta toma aspiramos 1ml de sangre

2.Se rellena con reactivo hasta la raya del 01 de la pipeta thoma.

3Se agita la mezcla durante 5 minutos.

4.Mientras se prepara la placa petri ,poniéndole un trozo de papel de filtro recortado para utilizarla
como como nevera.

5.Se desechan las 5 primeras gotas y se introducen en la cámara de Neubauer y se deja reposar en la "cámara húmeda"que hemos realizado anteriormente durante 15 minutos.

6.No olvidar lavar la pipeta thoma absorbiendo 3 veces en cada solución:agua del grifo,agua destilada y alcohol).

7.Se coloca la cámara de Neubauer en microscópio(hemos observado primero con el objetivo de 10x para ver primero la cuadrícula y después con el de 40x,con condensador bajo para observar las plaquetas.
Aquí teneis una observación como se ve desde el microscopio con una fotografía realizada en clase:

resultado:

hemos contado en un cuadrado 16 plaquetas.

Se realiza la fórmula  PLT=P x V x D= 16x10x100=16000.

Nuestro resultado nos a dado que habían 16000 plaquetas en 1mm3,
interpretación:
Como el resultado es demasiado inferior a los valores normales antes de diagnosticar una trombopenia se debería volver a realizar con una dilución menor y contando varios cuadrados grandes en vez de sólo uno.

hoja de trabajo:
1.¿que tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
la pipeta thoma.
2.¿que funciones desempeña el líquido de dilución empleado?
rompe los hematíes,evita la agregación de plaquetas entre sí y su adhesión a otros elementos,y facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refringentes.
3.¿cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo?
1ml para cada determinación.
4.¿con qué se puede preparar una cámara húmeda?
con una placa de petri añadiendola un trozo de papel de filtro mojado de agua.
5.¿con que objetivo se cuentan las plaquetas?
con objetivo de 10x y de 40x.
6.¿cómo se aprecian los trombocitos en éste recuento?
refringentes,(que reflactan la luz y se ven como gotitas de aceite)